1
گروه فیزیولوژی، پژوهشکده بیوتکنولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران
2
گروه سیستماتیک گیاهی، پژوهشکده بیوتکنولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهرکرد، شهرکرد، ایران
3
گروه فیزیولوژی، دانشکده علوم پزشکی شهرکرد، شهرکرد، ایران
4
فیزیولوژی، پژوهشکده بیوتکنولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهرکرد، شهرکرد، ایران
چکیده
مقدمه و هدف: جایگزینی سلولهای بتا بهوسیله پیوند جزایر پانکراس، نویدبخش درمان دیابت نوع 1 است. در مطالعات جانوری و انسانی، مشخص شدهاست که گیاه یونجه (Medicago sativa.L ) از خانواده لگومینیاسه، تواناییدارد قند خون را کاهشدهد؛ اغلب این مطالعات بر تأثیر عصاره گیاه بر میزان گلوکز ناشتا متمرکز شدهاند؛ تابهامروز، تحقیقی درخصوص ارزیابی توانایی این گیاه در تمایز سلولهای بنیادی به سلولهای بتای پانکراس در شرایط آزمایشگاهی انجامنشدهاست. مطالعه حاضر بهمنظور بررسی آثار احتمالی تروفیک عصاره گیاه یونجه(MSE) برتمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی (MSCs) به سلولهای انسولینساز (IPCs) انجامشدهاست.
مواد و روشها: سلولهای MSCsموش، جداسازی و بهصورت تکلایه کشتدادهشدند؛ سلولهای یادشده پس از تلاقی، با استفاده از آزمایشهای القای بافت چربی و استخوانی، شناسایی و تأییدشدند؛ بهمنظور القای تمایز در این سلولها به سلولهای انسولینساز، غلظتی مشخص از MSE به محیط کشت اضافه شد. رنگآمیزی دیتیزون(DTZ) بهمنظور بررسی سلولهای IPCs مشتق ازMSCs در شرایط آزمایشگاهی استفادهشد. سلولهای DTZ مثبت شمارش و با استفاده از نرمافزار آماری SPSS تجزیهوتحلیلشدند. حضور پروتئینهای اختصاصی سلولهای بتای پانکراس با استفاده از ایمنوفلورسنس تعیینشد.
نتایج: تیمار با MSE تأثیری چشمگیر بر تمایز سلولهای MSC به سلولهای IPCs داشت. در بررسی مورفولوژی سلولها با استفاده از DTZ دستجات سلولی قرمز ارغوانی مشابه جزایر لانگرهانس مشاهدهشد. سلولهای تمایزیافته نسبتبه سه آنتیبادی C - پپتید، انسولین – پروانسولین و رسپتور انسولین بتا پاسخ ایمنی دادند.
نتیجهگیری: نتایج نشاندادند که MSE بهطور مؤثری توانست باعث القای تمایز MSCs به سلولهای IPC شود. ازآنجاکه سلولهای MSC بهطور گسترده در دسترس بوده، بهراحتی کشتمیشوند، ابزار آزمایشگاهی ارزشمندی را برای مطالعه تمایز سلولهای بتای پانکراس فراهممیکنند.