مقدمه و هدف: افزایش کاربردهای درمانی برای اینترفرون گامای
انسانی نوترکیب (hrIFNg) که یک سایتوکین پیشالتهابی ضدویروسی است، موجب گسترش روشهای بهینهسازی
تولید آن شدهاست؛ در این مطالعه، تولید این گلیکوپروتئین در سیستم یوکاریوتی تکسلولی
Leishmania tarentolae
که از مارمولک tarentolae annularis بهدستمیآید، برای بیان ژن هترولوگ مورد بررسی قرارگرفتهاست. مواد و روشها: بهمنظور تکثیر cDNA ژن IFNg از روش RT-PCR
روی سلولهای تکهستهای خون محیطی تحریکشده با فیتوهماگلوتینین یک فرد ایرانی
سالم استفادهشد و بهمنظور بیان پروتئین hrIFNg، cDNA
تکثیرشده در دو کاست بیانی کلون شد. به نحوی که هر کاست بیانی دارای یک کپی از ژن hIFNg
بود؛ این کاستهای بیانی با روش الکتروپوریشن در جایگاه ژن RNA ریبوزومی (ssu)
L. tarentolae وارد شدند. پس
از ترانسفورم، کلونهای ترانسفورمشده در حضور آنتیبیوتیکهای اختصاصی انتخابشدند. نتایج: سازههای مورد
نیاز بیان اینترفرون گامای انسانی در سلولهای L. tarentolae تهیه و به داخل سلول انگل وارد شد و کارایی سازهها، با تکنیک
وسترن بلات تأییدشد. نتیجهگیری: تاکنون انواع مختلفی از سلولهای پروکاریوتی و یوکاریوتی بهعنوان سیستمهای بیانی در تولید پروتئینهای نوترکیب استفادهشدهاند ولی به
دلیل
ویژگیهایی،
اغلب
در
بیان
این
گلیکوپروتیین
ناموفق
بودهاند. سیستم بهکاررفته در این
مطالعه از خصوصیاتی ویژه ازقبیل سرعت رشد بالا، شرایط کشت ارزان و گلیکوزیلاسیون مناسب گلیکوپروتیینها بهرهمند
است که میتواند برای تولید پروتئین نوترکیب بهکاررود.
)