بررسی اثر لیتیوم کلراید در القای سلول‌های استرومایی مغز استخوان به سلول‌هایی با فنوتیپ عصبی

نویسندگان

چکیده

  مقدمه و هدف: سلول‌های استرومایی مغز استخوان ( BMSCs ) نوعی سلول‌های بنیادی بالغ با قدرت تمایز بالاهستند. ( BMSCs ) می‌توانند به سلول‌هایی با منشاء مزودرمی و غیرمزودرمی تمایز پیدا کنند. که با توجه به قابلیت دسترسی این سلول‌ها منبع مناسبی از سلول‌های بنیادی بالغ جهت سلول درمانی هستند. اغلب موادی که تاکنون جهت القاء سلول‌های بنیادی به سلول‌های عصبی استفاده شده‌‌است همچون: اسید رتینوئیک، دی‌متیل سولفوکساید ( DMSO )، دپرنیل و... ترکیبات سمّی هستند. لیتیوم یک داروی متعادل‌کننده خلق است( Mood stabilizer ) که اثرات محافظتی بر سلول‌های عصبی دارد. هدف ما از این پژوهش استفاده از لیتیوم کلراید به‌عنوان یک القاگر غیرسمّی برای القای فنوتیپ عصبی در سلول‌های استرومایی مغز استخوان است.   مواد و روش‌ها: BMSCs به روش آسپیراسیون مغز استخوان فمور و تیبیای رت‌های بالغ ماده تهیه و کشت داده شدند. پس از چهار پاساژ سلول‌ها به وسیله لیتیوم کلراید با دوز mM 5/0‌‌ به مدت 24 ساعت القاء شدند. سپس به دو روش بررسی میکروسکوپی و ایمونوسیتوشیمی بررسی گردیدند. در روش ایمونوسیتوشیمی از آنتی‌بادی علیه نوروفیلامنت‌های 160، 68 و 200 کیلودالتون و آنتی‌بادی علیه پروتئین سیناپتوفیزین جهت ارزیابی فنوتیپ عصبی استفاده شد.   نتایج: نتایج نشان داد که لیتیوم کلراید با دوز mM5/0 پس از 24 ساعت قادر است سلول‌های BMSCs را به سلول‌هایی با فنوتیپ عصبی القاءکند. سلول‌هایی که قبل از القاء نسبت به نشانگر فیبرونکتین مثبت بودند 95 درصد و سلول‌هایی که پس از القاء به نشانگرهای نوروفیلامنت‌های 160، 68 و 200 کیلودالتون و سیناپتوفیزین مثبت شدند به ترتیب 6/89، 92، 2/93 و 2/70 درصد به‌ دست آمد.

کلیدواژه‌ها