بررسی توالی ژن M2 ویروس‌های آنفولانزا جداشده از بیماران ایرانی در سال 1393 به‌منظور تعیین مقاومت به آدامانتان‌ها

نویسندگان

1 مرکز تحقیقات میکرب‌شناسی مولکولی، دانشگاه شاهد، تهران، ایران

2 پژوهشکدۀ علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران

3 پژوهشکدۀ علوم و فناوری زیستی، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران.

چکیده

مقدمه و هدف: آدامانتان‌ها (آمانتادین و ریمانتادین) سال‌ها برای پیشگیری و درمان عفونت با ویروس آنفولانزای A استفاده شده است. این داروها ممانعت کننده‌های پروتئین M2 این ویروس می‌باشند و برخی از جانشینی‌های اسید آمینه در قسمت بین غشائی این پروتئین سبب مقاومت به این داروها می‌شود. این مطالعه به‌منظور بررسی تغییرات توالی نوکلئوتیدی مرتبط با مقاومت به آدامانتان‌هادر ژن M2 ساب‌تایپ‌های H1N1 و H3N2 جدا‌شده از بیماران ایرانی در سال 1393 صورت گرفت.
 
مواد و روش‌ها: سواب‌های بینی گرفته‌شده در تهران طی زمستان سال 1393 از بیماران دارای علائم شبیه آنفولانزا با روش Real-Time Reverse Transcription PCR موردبررسی قرار گرفتند تا حضور ساب‌تایپ‌های H1N1 و H3N2 ویروس آنفولانزا تیپ A در آن‌ها تعیین گردد. سپس برخی از نمونه‌های مثبت از نظر این ویروس‌ها در کشت سلولی تکثیر داده شدند. برای تکثیر ژن M با روش Reverse Transcription PCR و آنالیز ژنتیکی چهار جدایه از هر ساب‌تایپ به‌طور تصادفی انتخاب گردیدند.
 
نتایج: مطالعۀ جهش‌های نقطه‌ای در توالی ژن M2 جدایه‌های موردبررسی نشان‌دهندۀ حضور شایع‌ترین جهش منجرشونده به مقاومت به آدامانتان‌ها یعنی جایگزینی اسید آمینۀ آسپاراژین به‌جای سرین در موقعیت 31 در همۀ آن‌ها بود. سایر جهش‌های ایجاد‌کنندۀ مقاومت به آدامانتان‌ها یافت نشد.
 
نتیجه­ گیری: با توجه به نتایج این مطالعه و گزارش‌های سایر محققان که نشان‌دهندۀ شیوع بالای جهش‌یافته‌های مقاوم به آدامانتان در جدایه‌های انسانی ویروس آنفولانزای A است، پیشنهاد می‌شود که آدامانتان‌ها برای درمان آنفولانزا استفاده نشوند.

کلیدواژه‌ها


1. Li TC, Chan MC, Lee N. Clinical implication of antiviral resistance in influenza. Viruses 2015; 7(9): 4929-44. 2. Treanor JJ. Influenza Viruses. In: RA Kaslow, LR Stanberry, JW Le Duc. editors. Viral Infections of Humans- epidemiology and control. New York: Springer Science + Business Media; 2014; 455-78. 3. Saito R, Li D, Shimomura C, Masaki H, Le MQ, Nguyen HL, et al. An off-seasonal amantadine-resistant H3N2 influenza outbreak in Japan. Tohoku Journal of Experimental Medicine 2006; 210(1): 21-7. 4. Król E, Rychłowska M, Szewczyk B. Antivirals-current trends in fighting influenza. Acta biochimica Polonica 2014; 61(3): 495-504. 5. Pielak RM, Chou JJ. Influenza M2 proton channels. Biochimica et Biophysica Acta 2011; 1808(2): 522-9. 6. Abed Y, Goyette N, Boivin G. Generation and characterization of recombinant influenza A(H1N1) viruses harboring amantadine resistance mutations. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2005; 49(2): 556-9. 7. Nelson MI, Simonsen L, Viboud C, Miller MA, Holmes EC. The origin and global emergence of adamantine resistant A (H3N2) influenza viruses. Virology 2009; 388(2): 270-8. 8. Hayden FG, de Jong MD. Emerging influenza antiviral resistance threats. Journal of Infectious Diseases 2011; 203(1): 6-10. 9. Deyde VM, Xu X, Bright RA, Shaw M, Smith CB, Zang Y, et al. Surveillance of resistance to adamantanes among influenza A (H3N2) and A (H1N1) viruses isolated worldwide. Journal of Infectious Diseases 2007; 196(2): 249-57. 10. Bright RA, Medina MJ, Xu X, Perez-Oronoz G, Wallis TR, Davis XM, et al. Incidence of adamantane resistance among influenza A (H3N2) viruses isolated worldwide from 1994 to 2005: a cause for concern. Lancet 2005; 366 (9492): 1175-81. 11. Dong G, Peng C, Luo J, Wang C, Han L, Wu B, et al. Adamantane-resistant influenza A viruses in the world (1902-2013): frequency and distribution of M2 gene mutations. PLoS One 2015; 10(3): e0119115. 12. Hurt AC. The epidemiology and spread of drug resistant human influenza viruses. Current Opinion in Virology 2014; 8: 22-9. 13. Yavarian J, Azad TM, Zheng X, Gregory V, Lin YP, Hay A. Amantadine resistance in relation to the evolution of influenza A (H3N2) viruses in Iran. Antiviral Research 2010; 88(2): 193-6. 14. Yavarian J, Mokhtari Azad T, Shafiei Jandaghi NZ, Nategh R. Amantadine-resistant influenza A (H3N2) viruses in Iran. Acta Virologica 2009; 53(2): 135-8. 15. Yavarian J, Shafiei Jandaghi NZ, Naseri M, Mokhtari Azad T. Characterization of variations in PB2, NS1, M, neuraminidase and hemagglutinin of influenza A (H3N2) viruses in Iran. Jundishapur Journal of Microbiology 2014; 7(3): e9089. 16. World Health Organization. CDC protocol of realtime RTPCR for influenza A (H1N1). 2009. Available from http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/CDCRealtimeRTPCR_SwineH1Assay-2009_20090430.pdf. 17. Schnell JR, Chou JJ. Structure and mechanism of the M2 proton channel of influenza A virus. Nature 2008; 451: 591-6. 18. Byarugaba DK, Ducatez MF, Erima B, Mworozi EA, Millard M, Kibuuka H, et al. Molecular epidemiology of influenza A/H3N2 viruses circulating in Uganda. PloS one 2011; 6(11): e27803. 19. Furuse Y, Suzuki A, Kamigaki T, Oshitani H. Evolution of the M gene of the influenza A virus in different host species: large-scale sequence analysis. Virology Journal 2009; 6: 67. 20. Melidou A, Kyriazopoulou V, Diza E, Alexiou S, Pierroutsakos Y. Antiviral resistance of influenza A (H3N2) strains isolated in northern Greece between 2004 and 2007. Euro Surveillance 2009; 14(4). 19104.