دانشور پزشکی

دانشور پزشکی

تراسفکشن پایدار سلول‌های استرومایی مغز استخوان توسط وکتورpSecTag2/HygroA-CNTF به‌منظور استفاده در درمان ضایعات نخاعی

نویسندگان
حجت اله عباس زاده 1
تقی طریحی 2
علی نوری زاده 3
مجید صادقی زاده 4
علیرضا عزیززاده دلشاد 5
طاهر طاهری 3
هادی کاظمی 3
1 دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی ایلام و مرکز تحقیقات علوم اعصاب شفای بیمارستان خاتم‌الانبیا
2 دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس
3 مرکز تحقیقات علوم اعصاب شفای بیمارستان خاتم‌الانبیا
4 دانشکده علوم پایه دانشگاه تربیت مدرس
5 دانشکده پزشکی دانشگاه شاهد
چکیده
مقدمه و هدف: ژن (CNTF) که یکی از اعضای خانواده ژن‌های نوروتروفیک است، در محافظت بقا گانگلیون‌های سیلیاری و نورونی شرکت‌دارد. CNTF تمایز و بقای گونه‌های مختلف نورون‌های حسی ، حرکتی، اتونوم و الیگودندروسیت‌ها را افزایش‌می‌دهد. به‌منظور افزایش خاصیت نوروتروفیکBMSCs پلاسمید pSec-Tag2/hygroA-CNTF ساخته‌ و با استفاده از لیپوفکتامین وارد سلول‌های BMSCs شد.

مواد و روش‌ها: پلاسمید pSec-Tag2/hygroA-CNTF ساخته‌شد و با استفاده از سکانسینگ مورد تأیید قرارگرفت و با استفاده از لیپوفکتامین به سلول‌های BMSCs، وارد شد.میزان رونویسی در ژن مورد نظر توسط RT-PCR محاسبه و میزان بیان پروتئین با استفاده از وسترن بلات و الیزا بررسی‌شد.

نتایج: سکانسینگ نشان‌داد که پلاسمید pSec-Tag2/hygroA-CNTF، دارای توالی صحیحی است. پس از ترانسفکشن، بیان ژن CNTF و بیان پروتئینی آن با استفاده از RT-PCR و وسترن بلات تأییدشد.

نتیجه‌گیری: پلاسمید pSec-Tag2/hygroA-CNTF با داشتن بیان مناسب در سلول‌های BMSCs می‌تواند درصورت پیوند، سبب افزایش بازسازی سلول‌های آسیب‌دیده پس از ضایعه نخاعی شود.
کلیدواژه‌ها
ترانسفکشن
ساب کلونینگ
BMSCs
CNTF
دانشور پزشکی
دوره 22، شماره 1 - شماره پیاپی 110
110
فروردین و اردیبهشت 1393
صفحه 69-76