تشخیص مولکولی باکتری مولد بروسلوز، جداشده از بیماران مبتلا به تب مالت توسط بررسی ژن‌های o‏mp25 و trpE با کمک PCR

نویسندگان

1 گروه میکروب‌شناسی، مرکز تحقیقات بیماری های سل و عفونی دانشگاه علوم پزشکی اراک

2 گروه سلولی و ملکولی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم دارویی تهران

3 گروه میکروبیولوژی، دانشکده پزشکی همدان،دانشگاه علوم پزشکی همدان

4 دانشکده پیراپزشکی،دانشگاه علوم پزشکی تهران

5 گروه سلولی و ملکولی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم دارویی تهران

چکیده

مقدمه و هدف: بیماری تب مالت یا بروسلوز، نوعی بیماری مشترک میان انسان و دام است. امروزه برای تشخیص بروسلوز، چندین تست سرولوژیک وجوددارند که انجام هریک از این تست‌ها با محدودیت‌هایی همراه است. هدف از این مطالعه، استفاده از PCR با توجه به ژن‌های omp25 و trpE به‌منظور بررسی مولکولی درافراد مبتلا به بروسلوز است.

مواد و روش‌ها: در تحقیق حاضر، 30 سویه کلینیکی مورد بررسی قرارگرفتند. تمام افراد مورد مطالعه دارای تست‌های ایمونولوژیک مثبت ازقبیل رایت و کومبس‌رایت بودند. نمونه‌ها در محیط کشت خون (BACTEC) و دمای37 درجه سیلیسیوس به‌مدت پنج روز انکوبه و پس از آن روی محیط بروسلا آگار به‌مدت سه روز کشت‌داده‌شدند؛ از کلنی‌های حاصل برای استخراج DNA توسط کیت استفاده‌شد. DNA استخراج‌شده به‌عنوان الگو برای تشخیص دقیق سویه‌های باکتریایی با کمک پرایمرهای اختصاصی ژن‌های omp25 و trpE در واکنش PCR مورد استفاده قرارگرفت.

نتایج: نتایج حاصل از واکنش تکثیر و وجود باندهای 486 و 490 جفت بازی مربوط به ژن‌های omp25 و trpE نشان‌دهنده صحت پرایمرهای طراحی‌شده بود؛ با تکثیر این قطعات جنس باکتری بروسلا به‌صورت اختصاصی شناسایی‌شد.

نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان‌می‌دهند که با تکثیر نواحی خاص از ژن‌های omp25 و trpE که جزء ژن‌های حفاظت‌شده جنس بروسلا هستند، شناسایی باکتری بروسلا توسط روش PCR امکان‌پذیر خواهدبود.

کلیدواژه‌ها

دانشور پزشکی
دوره 22، شماره 1 - شماره پیاپی 110
110
فروردین و اردیبهشت 1393
صفحه 35-40

فایل ها

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار