1
گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
2
گروه ایدز و هپاتیت، انسیتو پاستور ایران
3
گروه بیوتکنولوژی پزشکی ، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
چکیده
مقدمه و هدف: گیرندههای کایمریک سلولهای T روش خوبی برای ایمنوتراپی سرطان فراهمکردهاست. در این گیرنده بجای قطعه متغیر گیرنده سلول T از نانوبادی استفادهشدهاست. نانوبادی یا VHH کوچکترین قطعه آنتیبادی زنجیره سنگین شتری است که قابلیت اتصال به آنتیژن دارد و نیز همولوژی بسیاری با VH انسانی داشته، از قدرت ایمنی زایی اندکی بهرهمند است. سازه رسپتور کایمریکی که در آزمایشگاه ما ساختهشده دارای VHH-hing-CD28-CD3ζ است. اگرچه گیرندههای کایمریکی که از طریق CD3ζ فعال میشوند اینترفرون گاما آزاد میکنند، اما به علت نبود سیگنالهای کمک تحریکی نمیتوانند به طور کامل فعال شوند. لذا وجود CD28 باعث رهاسازی اینترلوکین 2 شده و تکثیر تومور را محدود میکند؛ اما باعث فعال شدن کامل T سل نمیشود. بهمنظور بهبود عملکرد گیرندههای کایمریک، اندودامینهای سه بخشی ساختهشدهاست که شامل CD28-OX40-CD3ζ است. به دنبال تحریک سلولهای T کمک محرک OX40 سیگنالهای قوی فعالسازی و طولانیمدت برای این سلولها ایجادمیکند که برای حفظ پاسخ ایمنی بسیار مهم است.مواد و روشها: در این تحقیق پرایمرهای همپوشان که 60% از توالی OX40 را در برداشت سنتز و قطعه CD28-Ox40-CD3ζ با روش SOE PCR ایجاد شد و سپس این توالی با قطعه CD28-CD3ζ در سازه VHH-hing-CD28-CD3ζ جایگزین شد. بعد از انتقال این سازه به درون سلولهای Jurkat) T) بیان گیرنده در سطح mRNA و عملکرد آن با روشهای semi-quantitative RT PCR و کیت الایزا سنجش IL-2 ارزیابیشد.نتایج و نتیجهگیری: نتایج حاکی از آن است که عملکرد و بیان سازه دارای OX40 بیشترشدهاست. با توجه به نتایج ارزیابی IL-2 و semi-quantitative RT PCR میتوان چنین نتیجهگیریکرد که میزان بیان سازههای pCDNA-1 hinge CAR-OX40 و pCDNA-2 hinge CAR-OX40 برابرند اما عملکرد سازه pCDNA-2 hinge CAR-OX40 بیشتر است.
خالقی, سپیده, رهبریزاده, فاطمه, آزاد منش, کیهان, رسایی, محمد جواد, & جعفری, فرنوش. (1399). ساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت T دارای کمک محرک OX40 علیه سلولهای سرطان سینه. دانشور پزشکی, 19(4), 1-8.
MLA
سپیده خالقی; فاطمه رهبریزاده; کیهان آزاد منش; محمد جواد رسایی; فرنوش جعفری. "ساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت T دارای کمک محرک OX40 علیه سلولهای سرطان سینه". دانشور پزشکی, 19, 4, 1399, 1-8.
HARVARD
خالقی, سپیده, رهبریزاده, فاطمه, آزاد منش, کیهان, رسایی, محمد جواد, جعفری, فرنوش. (1399). 'ساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت T دارای کمک محرک OX40 علیه سلولهای سرطان سینه', دانشور پزشکی, 19(4), pp. 1-8.
VANCOUVER
خالقی, سپیده, رهبریزاده, فاطمه, آزاد منش, کیهان, رسایی, محمد جواد, جعفری, فرنوش. ساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت T دارای کمک محرک OX40 علیه سلولهای سرطان سینه. دانشور پزشکی, 1399; 19(4): 1-8.
)