2
گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس
3
دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران
چکیده
مقدمه و هدف: ویروس پاپیلومای انسانی، عامل اصلی سرطان دهانه رحم است و بهراحتی از فردی به فرد دیگر منتقل میشود. برای جلوگیری از انتشار این ویروس، نیاز به تشخیص زودهنگام و حساس سرطان دهانه رحم بهخوبی احساس میشود. هدف از این مطالعه، غنیسازی کتابخانه فاژی بهمنظور جداسازی نانوبادیهای اختصاصی علیه پروتئین 1L ویروس پاپیلومای انسانی است. از این نانوبادیها میتوان در کیتهای تشخیصی با حساسیت بالا برای سرطان دهانه رحم استفادهکرد.مواد و روشها: تکثیر فاژهای حاوی کتابخانه نانوبادی در باکتری Escherichia coli انجامشد و غنیسازی کتابخانه به کمک روش نمایانسازی فاژی صورتگرفت. بهمنظور اطمینان از غنیسازی، تعداد فاژهای حاصل از هر مرحله شمرده شد و محصولات حاصل از هر مرحله غنیسازی به کمک روش پلی کلونال فاژ الایزا مورد بررسی قرارگرفتند؛ سپس بهترین کلونها از طریق روش مونوکلونال فاژ الایزا جداسازی شدند و با کمک تعیین توالی ژنی صحت آنها تأییدشد.یافتهها: صحت فرایند غنیسازی از طریق افزایش تعداد کلونها در خروجی غنیسازی و افزایش اختلاف جذب نوری با کمک روش فاژ الایزا، در طول موج 450 نانومتر بهاثباترسید و در انتها، 4 کلون به عنوان بهترین کلونها انتخابشدند.نتیجه گیری: پس از سه مرحله غنیسازی، کتابخانه فاژمیدی علیه پروتئین 1L چهار سویه ویروس پاپیلومای انسانی غنیسازی شد.
)