مقدمه و هدف: از مهم‌ترین عوامل ایجادکننده مننژیت‌های آسپتیک ویروسی، انتروویروس و ویروس اوریون است. برای اجتناب از درمان‌های غیرضروری، وجود یک تست تشخیصی سریع و حساس لازم است.   مواد و روش‌ها: RT-PCR چندگانه ( Multiplex ) یک روش سریع و حساس برای تشخیص به‏موقع عفونت‌های ویروسی سیستم اعصاب مرکزی است. از این روش برای شناسایی همزمان دو ویروس اوریون و انتروویروس استفاده شد. ابتدا تست PCR برای هر یک به طور جداگانه بهینه‌سازی و سپس برای جدا‌سازی همزمان دو ویروس استفاده گردید. از ژن بتا دو میکرو گلوبولین به‏‏عنوان کنترل داخلی استفاده شد.   یافته‌ها: 100 نمونه CSF (مایع مغزی – نخاعی) بیمار مشکوک به مننژیت جمع‌آوری و تست RT-PCR چندگانه بر روی آن‌ها انجام شد. تمام نمونه‌های جمع‌آوری شده از نظر کشت باکتریایی منفی بودند و از نوزادان و کودکان کم‌تر از 7 سال جمع‌آوری شده بود. 35 درصد موارد از نظر انتروویروس مثبت بودند و یک مورد نیز به طور همزمان از نظر هر دو ویروس مثبت بود.   نتیجه‌گیری: این تست یک روش حساس و سریع (در کم‌تر از 3 ساعت) برای تشخیص همزمان مننژیت‌های آسپتیک است که می‌توان از آن برای مطالعات اپیدمیولوژیک نیز استفاده کرد.